· 名词解释 ·
濕熱滅菌法是指用飽和水蒸氣、沸水或流通蒸汽進行滅菌的方法，以高溫高壓水蒸氣為介質，由於蒸汽潛熱大，穿透力強，容易使蛋白質變性或凝固，最終導致微生物的死亡，所以該法的滅菌效率比干熱滅菌法高，是藥物製劑生產過程中最常用的滅菌方法。
測量小知識 | 確保消毒滅菌效果的測量參數
本期為您介紹濕熱滅菌常見的5種方法。每種方法對壓力、溫度、時間分別有怎樣的要求？又適用於何應用？消毒滅菌效果如何？
濕熱滅菌的原理和方法
1、濕熱滅菌的原理
濕熱滅菌的原理是使微生物的蛋白質及核酸變形導致其死亡。這種變形首先是分子中的氫鍵分裂，當氫鍵斷裂時，蛋白質及核酸內部結構被破壞，進而喪失了原有功能。蛋白質及核酸的這種變形可以是可逆的，也可以是不可逆的。
雖然無所謂動能行結構被破壞，若氫鍵破裂的數量未達到微生物死亡的臨界值，則其分子很可能恢復到它原有的形式，微生物就沒有被殺死。為有效地使蛋白質變形，如採用高壓蒸汽滅菌時，就需要水蒸氣有足夠的溫度和持續時間，這對滅菌效果十分重要。
高溫飽和水蒸氣可迅速使蛋白質變形，在規定操作條件下，蛋白質發生變形的過程即微生物死亡的過程，是可預見和重複的。
（1）巴氏消毒法
亦稱低溫消毒法。目前主要用於牛乳消毒。國際上通用的巴氏消毒法主要有兩種：
- 一種是將牛奶加熱到62℃-65℃，保持30分鐘。採用這一方法，可殺死牛奶中各種生長型致病菌，滅菌效率可達97.3%-99.9%，經消毒後殘留的只是部分嗜熱菌及耐熱性菌以及芽孢等；但這些細菌占多數的是乳酸菌，乳酸菌不但對人無害反而有益健康。
- 第二種方法將牛奶加熱到75-90℃，保溫15-16秒，其殺菌時間更短，工作效率更高。但殺菌的基本原則是，能將病原菌殺死即可，溫度太高反而會有較多的營養損失。
（2）煮沸法
常用於食具、刀剪、注射器的消毒，方法是煮沸100℃（1個大氣壓狀態下），5min中可殺死細菌繁殖體，如于水中加入2%碳酸鈉，則可提高其沸點至105℃，可殺死芽胞。
（3）流通蒸氣滅菌法
是指在常壓條件下，採用100攝氏度流通蒸氣加熱殺滅微生物的方法，滅菌時間通常為30-60分鐘。該法適用於消毒以及不耐高熱製劑的滅菌，但不能保證殺滅所有芽孢，是非可靠的滅菌方法。
（4）間歇蒸汽滅菌法
利用反復多次的流通蒸汽加熱，殺滅所有微生物，包括芽胞。方法同流通蒸汽滅菌法，但要重複3次以上，每次間歇是將要滅菌的物體放到37℃孵箱過夜，目的是使芽胞發育成繁殖體。若被滅菌物不耐100℃高溫，可將溫度降至75℃～80℃，加熱延長為30～60分鐘，並增加次數。適用於不耐高熱的含糖或牛奶的培養基。
（5）高壓蒸汽滅菌法
103.4千帕蒸汽壓溫度達121.3℃，維持15-20分鐘，可殺滅所有細菌芽孢和繁殖體。
濕熱滅菌法可在較低的溫度下達到與幹熱法相同的滅菌效果，因為：① 濕熱中蛋白吸收水份，更易凝固變性；② 水分子的穿透力比空氣大，更易均勻傳遞熱能；③ 蒸汽有潛熱存在，每1克水由氣態變成液態可釋放出529卡熱能，可迅速提高物體的溫度。高壓濕熱滅菌法一般採用121℃，滅菌20-30min，如果是產孢子的微生物則應採用滅菌後適宜溫度下培養幾小時，再滅菌一次，以用於殺死剛剛萌發的孢子。